How to Clean ELSD for Polysorbate analysis(폴리소르베이트 분석을 위해 ELSD를 세척하는 방법) - WKB345982

목적 또는 목표

메탄올을 최종 치환 린스로 사용하여 대부분의 유기 필름에 축적된 물질을 제거합니다.

환경

• 2424 ELS 검출기
• ACQUITY UPLC ELS 검출기
• 2420 ELS 검출기

절차

폴리소르베이트(Polysorbate)의 Milford Demo Lab ELSD 세척 절차:

목표: 메탄올(Methanol) 최종 치환 헹굼액으로 유기 필름의 축적을 제거합니다.
일반 접근 방식: 따뜻한 용매와 가열된 튜브를 사용하여 물과 메탄올(Methanol)을 순차적으로 헹구어 ELSD 표면을 세척합니다. 메탄올(Methanol)은 모든 비휘발성 유기 용매를 제거할 수 있는 치환 용매로 작동합니다.

참고 1: 이 절차는 완전히 최적화되지 않았기 때문에 약간의 유연성이 있습니다! 검출기를 약 20분 동안 50/50 물/메탄올(Methanol)로 세척한 후 약 20분 동안 물, 마지막으로 약 20분 동안 메탄올(Methanol)로 세척하는 용매 사이클로 검출기를 3회 이상 플러시합니다. 새 검출기의 경우 이 작업을 3회 수행합니다(그림 1 참조). 바탕선이 양호하지 않을 경우 추가로 헹구어야 할 수 있습니다. 최상의 결과를 얻으려면 Milli-Q 물 및 LCMS 등급의 메탄올을 사용하십시오.

참고 2: 이는 Shutdown Method의 역할도 하며, 실행 시간을 123분으로 연장하고 끝에 1시간의 건조 시간을 추가합니다. 샘플 세트에 포함시킨 다음 램프, 컬럼 히터 등을 차단하는 Shutdown Method를 연결합니다(그림 2 참조).

참고 3: 외부 스위치가 포함된 경우 이러한 플러시를 위해 시스템이 ELSD로 유입되는지 확인하십시오. 컬럼을 유니온으로 교체하는 것을 잊지 마십시오.

그림 1. 62분의 실행 시간을 계획합니다. 이는 용매 헹굼 과정에서만 순환됩니다. Inject Immediate Standard를 사용하여 데이터를 수집합니다. 데이터를 수집하지 않으려면 Condition Column(조건 열)을 사용하십시오.

그림 2. 종료 플러시/종료와 동일한 주기 + 건조 시간을 활용하여 이를 123분으로 연장합니다. 또한 Shutdown Method를 포함하여 컬럼과 램프를 끄고 가스 흐름을 낮추어 시스템을 완전히 종료합니다.

그림 3. (청정한 검출기의) 일반적인 압력 프로파일 및 ELSD 시그널.

기본 매개변수:
이동상 라인 C = 메탄올

이동상 라인 D = 물

컬럼: 50C

Gradient Table:
50/50 물/메탄올, 100% 물, 100% 메탄올 순입니다. 총 62분 동안 1분 전환합니다.
종료를 위해 이 기울기를 추가로 60분 동안 계속하여 드리프트 튜브(베이크아웃 기간) 및 광학계를 1시간 동안 건조시킵니다.
[물론 해당 기울기 테이블 전환으로 라인 C/D를 전환할 수 있습니다. 저는 라인 D를 물에 두었을 뿐입니다].

ELSD 매개 변수:
게인: 80
데이터 속도: 20 pps
시간 상수: 정상, 0.1000초
기체 압력: 50 psi
Nebulizer: 90%에서 가열
드리프트 튜브: 80C ± 5C

부록:
Flush Method 스크린샷:

참고 4: 옵션인 전환 밸브를 사용하면 ELSD가 외부 스위치(사용 가능한 경우)로 제어할 수 있습니다. 이는 세척 중 ELSD로 전환하고 베이크아웃 기간 동안 다시 ELSD에서 벗어나도록 전환을 자동화하는 데 사용할 수 있습니다.

Full Shutdown의 경우: (시작을 위해 실수로 ELSD가 넘치지 않도록 waste로 전환하는 것이 좋습니다).

크로마토그래피의 예:

세척 전, 용매 스파이킹을 이용한 대표적인 Blank 주입:

세척 후, 대표적인 Blank에서 용매 스파이킹이 관찰되지 않거나 거의 관찰되지 않음:

추가 정보