높은 크로마토그래피 백그라운드 및 오염을 방지하거나 제거하기 위해 추출 물질 및 침출 물질 애플리케이션용 ACQUITY UPLC 시스템을 세척하는 방법 - WKB101758

목적 또는 목표

추출 물질 및 침출 물질 애플리케이션용 ACQUITY UPLC 시스템을 세척하여 높은 크로마토그래피 백그라운드 및 오염을 방지하거나 제거합니다.

(타겟 분석 성분이 새 시스템의 백그라운드 이온으로 종종 관찰되기 때문에 ACQUITY의 설치 후 세척은 E&L 응용 분야에서 매우 중요합니다. 기존 오염을 제거하고 백그라운드 간섭을 방지하거나 줄이기 위해 산/염기성/IPA 세척이 권장됩니다. 이 문서는 WKB16167의 수정된 버전으로, E&L 응용 프로그램에 맞게 조정되었습니다.)

환경

• ACQUITY UPLC

절차

1. 현재 백그라운드를 설정하려면 일상적인 응용에 사용되는 기울기 및 용매로 Blank(100% 메탄올) 주입을 2-3회 실행합니다.
2. 최고 품질의 용매를 사용하고 있는지 확인하고 다음의 용매를 500mL 준비합니다.
   • 산성 세척제: 25:25:25:25 IPA/메탄올/아세토니트릴/물 + 5% 포름산
   • 염기 세척제: 10% 암모니아(Ammonia)
   • 순수한 IPA
   • 80:10 물/메탄올(씰(seal) 세척)
3. ACQUITY 세척 절차를 실행하기 전에 컬럼을 분리하고 연결 유니온으로 교체합니다. 액티브 프리히터의 Outlet 튜빙 또는 컬럼을 교체하는 유니온은 waste로 실행해야 합니다.
4. 샘플 루프가 사용되는 경우, 루프가 Sample Manager에 설치되었는지 확인합니다.
5. MS에서 LC를 분리합니다. 질량분석기로 가는 흐름이 없어야 합니다!
6. LC-MS 흐름 경로에 일반적으로 존재하는 모든 PEEK 라인이 세척 흐름 경로에 남아 있는지 확인합니다.
7. 90:10 물/메탄올(Methanol)에 씰(seal) 세척액을 넣고 다른 모든 라인은 산성 세척제에 넣습니다.
8. 하나의 산 세척제 바이알을 Autosampler 위치 1:A,1에 장착합니다.
9. 모든 ACQUITY 라인 플러시: A 및 B 라인은 10회, 매회 5분 동안 프라임해야 합니다. 샘플 실린지를 포함한 실린지는 산성 세척제로 프라임해야 합니다. 씰(seal) 세척은 90:10 물/메탄올(Methanol)로 5분 동안 프라임해야 합니다.
10. "LC METHOD 1"으로 산 세척제를 사용하여 10회 주입합니다. 그 다음 "LC METHOD 2"로 산성 세척제를 사용하여 10회 주입합니다. 필요한 경우 dummy MS Method를 생성하고 로드합니다. 주입 부피는 10µL입니다.

10. 워터 플러시로 시스템에서 산을 제거합니다. 주입이 필요하지 않습니다. 씰(seal) 세척을 제외한 모든 ACQUITY 라인을 염기 세척제에 넣습니다. A 및 B 라인은 10회, 매회 5분 동안 프라임해야 합니다. 샘플 실린지를 포함한 실린지는 프라임은 염기 세척제에서 수행되어야 합니다.

11. 하나의 염기 세척제 바이알을 Autosampler 위치 1:A,2에 장착합니다.

12. LC METHOD 1로 10회의 염기 세척제 주입을 진행한 후 LC METHOD 2로 10회의 염기 세척제 주입을 수행합니다.

13. 워터 플러시로 시스템에서 염기를 세척합니다. 주입이 필요하지 않습니다. 씰(seal) 세척을 제외한 모든 ACQUITY 라인을 IPA에 넣습니다. A 및 B 라인은 10회, 매회 5분 동안 프라임해야 합니다. 샘플 실린지를 포함한 실린지의 프라임은 IPA에서 수행되어야 합니다.

14. 하나의 IPA 바이알을 Autosampler 위치 1:A,3에 넣습니다.

15. LC METHOD 1로 10회의 IPA 주입을 진행한 후 LC METHOD 2로 10회의 IPA 주입을 수행합니다.

16. ACQUITY 용매 라인을 적절한 용매에 넣고 사용하지 않는 라인은 IPA에 두십시오.

17. 일상적인 응용에 사용되는 기울기 및 용매로 Blank 메탄올 주입을 실행하고 세척 전 Blank 주입과 비교합니다.

세척 전과 후의 메탄올 Blank의 예가 여기에 나와 있습니다. (이러한 예는 시스템 사양에 부합된 것이 아니라 참고용입니다.)

세척 전 - 메탄올 Blank

세척 후 - 메탄올 Blank

추가 정보