새 역상 컬럼에서 염기성 화합물 테일링이 더 많이 발생하고 주입을 더 많이 수행할수록 테일링이 감소하는 이유는 무엇입니까? - WKB235916

환경

• 역상 컬럼
• 테일링
• 피크 모양
• 실라놀

답변

염기성 분석 물질의 테일링은 다음과 같이 발생합니다.

• 입자 표면의 실라놀기(Si-O^-)는 일반적으로 pH가 약 2.0 이상인 경우 음전하를 띠게 됩니다.
• 염기는 낮은 pH 환경에서 일반적으로 양전하를 띠고 있습니다.
• 테일링은 양전하를 띤 염기가 입자 표면의 음전하를 띄는 실라놀 그룹과 이온 쌍을 이루기 때문에 발생합니다.

새 역상 실리카 기반 입자 컬럼 또는 하이브리드 입자 컬럼을 사용하고 Method의 pH > 2.0인 경우:

• 표면 실라놀은 음전하를 띠게 되므로, 컬럼은 역상 컬럼과 양이온 교환 컬럼의 역할을 모두 수행하게 됩니다.
• 주입이 처음 이루어지면 염기성 분석 물질은 이러한 실라놀 그룹과 이온 쌍에 완전히 접근할 수 있습니다.

컬럼에 염기성 분석 물질을 더 많이 주입하면 다음과 같이 됩니다.

• 이전 주입의 염기성 분석 물질은 실라놀 그룹과 이온 쌍을 이루어 패킹에 흡착될 수 있습니다.
• 패킹에 대한 분석 물질 이온 쌍이 많을수록 후속 주입에서 염기성 분석 물질을 끌어들이는 데 사용할 수 있는 실라놀 그룹이 점점 줄어듭니다.
• 실라놀에 대한 접근이 적기 때문에 나중에 주입할 때 테일링이 덜 나타날 수 있습니다. 이러한 분석 물질-실라놀 상호 작용을 "차단"하는 프로세스를 "컨디셔닝"이라고 합니다.

추가 정보

이러한 경향이 관찰된 새 컬럼 에서 테일링의 양을 줄이는 한 가지 방법은 염기성 분석 물질의 고농도 표준물질로 새 컬럼에 "컨디셔닝 주입"을 3회 이상 수행하는 것입니다. 이 단계의 목표는 활성 부위(실라놀 그룹)를 염기성 분석 물질 로 포화시켜 향후 샘플 주입에서 분석 물질-실라놀 상호 작용을 차단하는 것입니다.

참고 항목:

C18 컬럼에서 역상 분석법을 실행할 때 염기성 화합물의 테일링을 줄이는 방법 - WKB92122