C18 컬럼에서 역상 분석법을 실행할 때 염기성 화합물의 테일링을 줄이는 방법 - WKB92122

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환경

사용 중인 입자의 유형에 따라 옵션도 다릅니다. 추가 정보 섹션을 참조하십시오.

C18 컬럼의 염기성 화합물 테일링은 입자의 표면 실라놀기가 이온화(탈 양성자화, 음전하)되고 약염기가 이온화(양성자화, 양전하)되기 때문에 발생합니다. (강염기는 사실상 항상 이온화됩니다(양성자화, 양전하).)

다음은 테일링 문제를 완화하는 데 도움이 되는 입자 유형에 따른 몇 가지 옵션입니다.

Bridged ethylene hybrid (BEH) C18 (pH 범위 1-12):

낮은 pH 이동상(~pH 2.0-3.0)은 테일링의 양을 낮추기 위해 실라놀기를 중화시키는 데 사용될 수 있습니다.
높은 pH 이동상(~pH 10.0)을 사용하여 약염기를 중화하고 테일링을 완화할 수 있습니다. 높은 pH는 강염기를 중화하는 데 사용할 수 없습니다.
이온 페어링 제제는 표면 실라놀기와 양전하를 띤 염기성 분석물질 사이의 양이온 교환 메커니즘을 차단하는 데 사용할 수 있습니다.
- 수용성 및 유기 이동상 모두에서 0.1% TFA(trifluoroacetic acid)를 사용할 수 있습니다.
  - TFA는 pH를 약 2.0으로 낮추어 실라놀기를 중화시킵니다.
  - 또한 TFA는 양이온 교환 메커니즘을 차단하기 위해 하전 염기의 양전하에 이온 쌍을 이룹니다.
- 양이온 교환 메커니즘을 차단하고 테일링을 줄이기 위해 PIC(paired ion chromatography) 시약을 사용할 수 있습니다.

Charged surface hybrid (CSH) C18 (pH 범위 1-11):

이 패킹에서 대부분의 경우, 포름산이 0.1%인 낮은 pH 이동상(pH ~3.0)이 약염기와 강염기 조건 모두에서 테일링을 줄일 수 있습니다.
높은 pH 이동상(~pH 10.0)을 사용하여 약염기를 중화하고 테일링을 완화할 수 있습니다. 높은 pH는 강염기를 중화하는 데 사용할 수 없습니다.
이 패킹 전하의 양성 표면은 분석 물질의 양전하를 감소시키는 데 도움이 되며, 양이온 교환 메커니즘을 최소화하여 테일링을 줄입니다.
0.1%의 포름산이 테일링을 충분히 낮추지 못할 경우, 경우에 따라 0.05%에서 최대 0.1%까지 TFA의 이온쌍을 사용하는 것이 도움이 될 수 있습니다.

실리카 기반 C18을 사용할 경우 높은 pH를 사용하여 약염기를 중화할 수 없습니다. (실리카는 pH 8.0 이상에서 용출됩니다.)
낮은 pH 이동상(~pH 2.0-3.0)은 테일링의 양을 낮추기 위해 실라놀기를 중화시키는 데 사용될 수 있습니다.
- 수용성 및 유기 이동상 모두에서 0.1% 포름산을 사용하면 도움이 될 수 있습니다.
- 다른 산성 변형제를 사용하십시오.
이온 페어링 제제는 표면 실라놀기와 양전하를 띤 염기성 분석물질 사이의 양이온 교환 메커니즘을 차단하는 데 사용할 수 있습니다.
- 수용성 및 유기 이동상 모두에서 0.1% TFA(trifluoroacetic acid)를 사용할 수 있습니다.
  - TFA는 pH를 약 2.0으로 낮추어 실라놀기를 중화시킵니다.
  - 또한 TFA는 양이온 교환 메커니즘을 차단하기 위해 하전 염기의 양전하에 이온 쌍을 이룹니다.
- 양이온 교환 메커니즘을 차단하고 테일링을 줄이기 위해 PIC(paired ion chromatography) 시약을 사용할 수 있습니다.

HPLC 컬럼 기능 브로셔

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