Empower 3에서 474 스펙트럼 스캔을 표시하는 방법 - WKB16835

환경

• Empower 3
• 474 스캐닝 FLR 검출기

답변

Millennium 소프트웨어의 경 우이 절차를 따르십시오. Empower에서도 작동합니다.

1. 스캐닝 성공은 방출(emission) 파장뿐만 아니라 적합한 여기(excitation) 선택에 달려 있음에 유의하십시오.
2. 방출 스캔은 여기(excitation)보다 10nm 더 높은 파장에서 시작됩니다.
3. 스캐닝은 두 가지 작업을 포함하며, 저장된 스펙트럼을 저장한 다음 출력합니다. 문제를 해결하려면 먼저 이동상을 스캔하고 간섭이 없는지 확인합니다. 나중에 동일한 이동상에 용해된 표준 샘플에서 이 샘플을 뺄 수 있습니다.
4. Flowcell bulkhead 피팅(Fitting)에 직접 나사로 고정되는 HPLC 피팅(Fitting)이 연결된 프라임 실린지를 사용하여 이동상으로 셀을 채웁니다. 검출기만 사용하고 HPLC에서 흐름을 차단합니다.
5. 키보드에서 Scan을 누릅니다.
6. Em Scan이라는 첫 번째 옵션이 제공됩니다.
7. 스캔 매개 변수를 설정하려면 End 키를 누릅니다.
8. edit/enter를 누르고, 스캔을 STD로 설정하고, 아직 설정하지 않은 경우, edit/enter를 다시 누릅니다.
9. 속도를 가장 느린 스캔 속도로 변경합니다. 즉 깜빡이는 프롬프트에서 위쪽 화살표 키를 사용하여 "2"를 선택하고 edit/enter를 누릅니다.
10. Emission Scan으로 돌아가려면 Monitor 키를 누릅니다. 다른 유형의 스캔을 수행하려는 경우 위쪽 및 아래쪽 화살표를 사용하여 다른 기능으로 이동합니다.
11. edit/enter를 누르고 메모리 위치 1-20을 선택합니다.
12. edit/enter 키를 누르고 여기(excitation) 파장을 선택합니다. 숫자 키(시프트 키가 필요 없음)를 사용합니다.
13. edit/enter 키를 누른 다음 next 키를 눌러 Program Run 키를 사용하여 스캔을 시작합니다. Millennium에 가기 전에 스캔을 수집하는 검출기를 시작합니다. 여기(excitation) 파장이 300nm이면 310nm에서 스캔이 시작됩니다.
14. Quickset을 입력하고 흐름이 없는 상태에서 평소와 같이 Instrument Set 및 Method Set을 구축합니다.
15. Quickset에서 Method Set을 로드하고 설정을 누르십시오. 초기 스캔 테스트의 경우 모니터 베이스라인을 시작하기만 하면 됩니다. 스캔을 스케일로 유지하게 하려면 Gain을 조정해야 할 수 있습니다.
16. 검출기로 돌아가서 지금 저장된 스캔을 출력합니다. Scan을 누르고 위쪽 화살표 키를 사용하여 scan function 3을 선택합니다. 방출(emission) 스펙트럼이 출력되거나 474 EM, D.에 표시됩니다.
17. edit/enter를 누르고 저장 위치를 선택한 다음 edit/enter를 다시 누릅니다.
18. 정지 및 시작 파장을 변경할 수 있지만, 테스트하려면 전체 범위로 유지하십시오(예: 310-900nm). edit/enter를 눌러 페이지를 처음부터 끝까지 읽습니다.
19. Program run 키를 사용하여 시작합니다. 데이터는 Millennium monitor baseline에 표시되어야 합니다. 스케일 범위를 초과하면 게인 설정을 낮추고 스펙트럼을 다시 수집한 다음 다시 출력합니다.
20. 게인이 올바르게 설정되면 이동상을 액티브 용액이나 표준물질(이동상에 용해됨)로 교체한 후 이 과정을 반복합니다. 이제 이동상과 샘플의 비교를 통해 이동상 간섭의 존재 여부를 확인합니다.
21. 물론, 결과가 만족스럽지 않은 경우, 새로운 여기(excitation) 파장을 선택하고 다시 프로세스를 시작해야 합니다.
22. 출력된 스펙트럼을 저장하려면 소프트웨어가 데이터 수집을 시작한 후에 Run program 키를 눌러 주입을 제로로 만듭니다. 파장을 계산할 수 있습니다. 초당 1 데이터 포인트에서 스캔이 시작되는 위치가 분명해야 합니다.

    Millennium의 스캔 시간(분) =

    {(900nm - (Excitation Wavelength + 10nm))/30nm/초}/Min은 Millennium에 표시됩니다.

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