TargetLynx XS를 사용하여 표준물질의 내인성 또는 편재(ubiquitous) 농도를 보정하는 방법 - WKB224070
목적 또는 목표
TargetLynx XS를 사용하여 매트릭스 매칭 검량선에서 C0을 보정합니다.
거의 모든 바이오분석 또는 식품 및 환경 LC-MS/MS Method는 분석법 정밀도, 매트릭스 효과, 정확도 및 직선성을 평가하기 위해 인증 매트릭스 스파이킹을 사용합니다[1]. Bioanalytical Method에서 스파이킹 실험에 사용되는 매트릭스는 종종 정량화할 화합물의 내인성 수준을 포함합니다. 이와 유사하게, 식품 및 환경 분석에서도 매트릭스에는 잔류성 유기 오염 물질(POP)과 같은 보편적 화합물이 포함되어 있습니다. 이 문서에서 스파이크 실험에 사용되는 매트릭스에 존재하는 내인성 또는 편재 농도를 농도 0(C0)이라고 합니다.
LC-MS/MS에서 매트릭스 효과를 극복하기 위해, 알려진 농도의 표준물질을 인증된 매트릭스에 주입하여 검량선을 작성하는 경우가 많습니다. 이를 매트릭스 매칭 검량이라고 합니다. 내인성 또는 편재 농도(C0)의 보정에 실패하면 편향을 일으키게 됩니다.
이 문서의 목적은 TargetLynx XS를 사용하여 매트릭스 매칭 검량선에서 C0을 보정하는 방법에 대한 지침을 제공하는 것입니다. 절차를 설명하기 위해, 혈장 샘플을 네 가지 수준에서 스파이킹하여 매트릭스 매칭 검량을 준비했습니다. 내인성 양의 테스토스테론을 함유한 혈장도 스파이킹 없이 (C0)분석됩니다. 매트릭스에 존재하는 내인성 양을 무시할 경우, 검량선에 높은 y 절편이 나타나 편향이 발생하게 됩니다.
환경
- TargetLynx XS
절차
매트릭스에 존재하는 내인성 농도를 보정하려면 다음 단계를 따르십시오.
- 표준물질 추가 실험을 이용한 매트릭스의 C0 측정
스파이크되지 않은 매트릭스(C0)와 4개의 스파이크 수준을 분석했기 때문에 표준물질 추가 계산을 사용하여 C0을 측정할 수 있습니다. TargetLynx XS는 이 계산을 자동으로 수행할 수 있는 기능을 제공합니다. 자세한 내용은 문서 "TargetLynx에서 표준물질 추가 계산을 수행하는 방법"을 참조하십시오. - 표준물질의 테스토스테론 농도 보정
이제 C0가 알려졌으므로 표준물질의 농도를 보정할 수 있습니다. 이를 위해서는 샘플 목록에 지정된 테스토스테론 표준물질 농도를 다음과 같이 보정해야 합니다. 샘플 목록의 표준물질 농도 = 스파이크 농도 + C0 - 샘플 프로세스
교정 시 검량선은 0에 가까운 y 절편을 생성합니다. 스파이킹되지 않은 매트릭스 C0을 검량 포인트로 추가할 수도 있습니다.
