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TargetLynx XS를 사용하여 표준물질의 내인성 또는 편재(ubiquitous) 농도를 보정하는 방법 - WKB224070

Article number: 224070To English version

목적 또는 목표

TargetLynx XS를 사용하여 매트릭스 매칭 검량선에서 C0을 보정합니다.

거의 모든 바이오분석 또는 식품 및 환경 LC-MS/MS Method는 분석법 정밀도, 매트릭스 효과, 정확도 및 직선성을 평가하기 위해 인증 매트릭스 스파이킹을 사용합니다[1]. Bioanalytical Method에서 스파이킹 실험에 사용되는 매트릭스는 종종 정량화할 화합물의 내인성 수준을 포함합니다. 이와 유사하게, 식품 및 환경 분석에서도 매트릭스에는 잔류성 유기 오염 물질(POP)과 같은 보편적 화합물이 포함되어 있습니다. 이 문서에서 스파이크 실험에 사용되는 매트릭스에 존재하는 내인성 또는 편재 농도를 농도 0(C0)이라고 합니다.

LC-MS/MS에서 매트릭스 효과를 극복하기 위해, 알려진 농도의 표준물질을 인증된 매트릭스에 주입하여 검량선을 작성하는 경우가 많습니다. 이를 매트릭스 매칭 검량이라고 합니다. 내인성 또는 편재 농도(C0)의 보정에 실패하면 편향을 일으키게 됩니다.

이 문서의 목적은 TargetLynx XS를 사용하여 매트릭스 매칭 검량선에서 C0을 보정하는 방법에 대한 지침을 제공하는 것입니다. 절차를 설명하기 위해, 혈장 샘플을 네 가지 수준에서 스파이킹하여 매트릭스 매칭 검량을 준비했습니다. 내인성 양의 테스토스테론을 함유한 혈장도 스파이킹 없이 (C0)분석됩니다. 매트릭스에 존재하는 내인성 양을 무시할 경우, 검량선에 높은 y 절편이 나타나 편향이 발생하게 됩니다.

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환경

  • TargetLynx XS

절차

매트릭스에 존재하는 내인성 농도를 보정하려면 다음 단계를 따르십시오.

  1. 표준물질 추가 실험을 이용한 매트릭스의 C0 측정
    스파이크되지 않은 매트릭스(C0)와 4개의 스파이크 수준을 분석했기 때문에 표준물질 추가 계산을 사용하여 C0을 측정할 수 있습니다. TargetLynx XS는 이 계산을 자동으로 수행할 수 있는 기능을 제공합니다. 자세한 내용은 문서 "TargetLynx에서 표준물질 추가 계산을 수행하는 방법"을 참조하십시오.
  2. 표준물질의 테스토스테론 농도 보정
    이제 C0가 알려졌으므로 표준물질의 농도를 보정할 수 있습니다. 이를 위해서는 샘플 목록에 지정된 테스토스테론 표준물질 농도를 다음과 같이 보정해야 합니다. 샘플 목록의 표준물질 농도 = 스파이크 농도 + C0
  3. 샘플 프로세스
    교정 시 검량선은 0에 가까운 y 절편을 생성합니다. 스파이킹되지 않은 매트릭스 C0을 검량 포인트로 추가할 수도 있습니다.

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