낮은 분리능 또는 불량 피크 모양으로 인해 QTof(Xevo, Cyclic 또는 SYNAPT) 검량 실패 - WKB1813

증상

• Xevo 또는 Synapt QTof에서 검량 또는 검량 확인에 실패했습니다.
• 검량이 실행되지만 일부 피크가 일치하지 않고 수동으로 추가할 수 없습니다(한 피크만 일치시킬 수 있음).
• 피크에는 느낌표(!)가 표시될 수 있습니다.
• 질량이 증가할 때 잔류 질량도 증가합니다(아래 그림 참조).
• 질량 정확도가 낮습니다.
• GluFib의 분리능이 낮습니다.

환경

• MassLynx
• Intellistart
• UNIFI
• SYNAPT XS
• Synapt G2-Si
• Synapt G2-S
• Synapt G2
• Xevo G2-XS
• Xevo G2-S
• Xevo G2
• Xevo QTof

원인

스펙트럼 분리능 또는 피크 모양 불량

수정 또는 해결 방법

1. Tune 페이지를 열고 Setup > System View를 선택하여 분해능을 튜닝합니다(암호는 "access"입니다).
2. 검량 용액을 새로 만든 것인지 확인하거나 새 샘플을 주문하십시오.
3. Tune 페이지에서 System > Acquisition Settings를 선택합니다. 창의 왼쪽 하단에 표시되는 Resolution 값(해당 분해능 모드에서 예상되는 분해능)을 기록한 다음 창을 닫습니다.
4. Lockmass 피크를 확대하고 Lockspray 모세관 전압을 낮추거나, System 2 탭에 액세스하고, pDRE Test 영역에서 Attenuate를 선택하고 Transmission를 조정하여 카운트를 약 -e4초중반 카운트로 조정합니다. 가능한 경우 Tune 페이지에서 피크를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 Intensity > Normalize Data를 선택합니다. 이 설정을 통해 사용자는 분해능을 튜닝할 때 감도의 증가 또는 감소 여부를 확인할 수 있습니다.
5. 피크를 확대하여 피크 모양을 쉽게 관찰 가능합니다.
6. System 2 페이지에서 검은 색 숫자의 오른쪽에 나타나는 슬라이더를 클릭한 다음 키보드의 왼쪽 화살표 및 오른쪽 화살표 키를 사용하여 reflectron grid를 조정합니다. reflectron grid 튜닝의 목적은 최상의 분리능, 피크 모양 및 감도를 위함이며, 가장 높은 우선 순위는 분리능입니다.
7. System 1 페이지에서, 숫자 오른쪽에 검은 색으로 나타나는 슬라이더를 클릭한 다음 키보드의 왼쪽 화살표 및 오른쪽 화살표 키를 사용하여 푸셔 오프셋을 조정합니다. 푸셔 오프셋 튜닝의 목적은 최상의 분리능, 피크 모양 및 감도를 위함이며 가장 높은 우선 순위는 피크 대칭성입니다.
8. 분리능이 2단계에서 기록한 분리능에 접근하거나 그 이상인 경우, Console로 이동하여 Normal mode (Intellistart > Configure > Normal mode)를 선택하고 Use calibration profile을 선택한 다음 Start를 클릭합니다.
9. uncal을 찾아 OK를 클릭합니다.
10. 다시 Tune 페이지의 Acquisition settings로 이동하여 Calculate를 클릭하고 veff를 설정합니다. 표준물질의 accurate mass를 지정하고(lockmass 화합물, 양이온 모드에서 leucine enkephalin의 경우 556.2771) Tune 페이지에서 관찰된 질량을 측정된 질량의 소수 2자리로 지정합니다. Update를 클릭하고 몇 초 후에 창을 닫습니다.
11. 이전에 Normalise 선택을 해제한 경우 Normalize를 다시 선택해야 합니다(Tune 페이지에서 피크를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 Intensity > Nomalise Data 선택). 또한 lockspray 캐필러리 전압을 정상값으로 재설정하고 필요시 System 2 탭의 Attenuate를 선택 해제할 수 있습니다.
12. 튜닝 설정과 시스템 설정을 저장합니다.
13. 검량될 다른 모든 이온 모드에 대해 이 절차를 반복합니다.
14. Intellistart를 이용해 튜닝된 기기를 검량합니다. 새로운 검량은 훨씬 향상된 질량 정확도를 제공해야 합니다.

추가 정보

새로 검량 용액을 만듭니다.

검량을 수행하기 전에 분해능을 튜닝하는 것이 좋습니다. 튜닝은 정기적으로 수행할 경우 더 수월해 집니다.

분해능은 소프트웨어의 MS Console에서 최적화할 수 있습니다. lockspray 유로에서 leucine enkephalin을 주입한 후 resolution optimization -> Leucine Enkephalin MS LS 프로파일을 선택한 다음 최적화가 필요한 모드를 선택합니다.