상대 검량(Relative Calibration)을 위한 Processing Method 생성을 다루는 방법 - Tip124

목적 또는 목표

Get Empowered에 돌아온 것을 환영합나다! Empower Chromatography Data Software에 대한 Empower의 마지막 Tip-of-week 게시물에서 우리는 Processing Method에서 Peak Ratio 기능을 사용하는 방법을 배웠습니다(Tip #123).

이번 주 Tip에서는 Empower에서 GPC/SEC 데이터로 작업하는 방법에 대한 새로운 시리즈를 시작할 것입니다.

다음과 같은 주제가 포함됩니다.

• Processing Method 만들기
• Relative, Universal 및 Cumulative Matching 검량과 같은 다양한 유형의 검량 작업
• 여러 검출기로 작업

GPC(Gel Permeation Chromatography)는 유기 폴리머로 작업할 때 참조됩니다. SEC 또는 Size Exclusion Chromatography는 바이오의약품 작업에 참조됩니다. 이 두 경우 모두, 이러한 유형의 크로마토그래피는 용액 내 유효 크기를 기준으로 화합물을 분리합니다.

이 Tip에서는 좁은 또는 단일 분산 표준 물질을 사용한 상대 검량(Relative Calibration)을 위한 Processing Method의 생성 방법에 대해 설명합니다. 이 기술의 이점은 표준 물질과 화학적 성질이 동일한 폴리머에 대해 쉽고 정확하다는 것입니다. 단점은 모든 유형의 폴리머에 대해 좁은 표준 물질을 사용할 수 없다는 것입니다.

환경

• Empower

절차

1. 표준 물질 및 샘플에 대한 대표적인 크로마토그램을 선택하고 Review로 가져옵니다. 일반적으로 좁은 표준 물질을 이용한 상대 검량은 단일 분산 표준 물질의 mixture 또는 cocktail을 주입하여 수행됩니다. Run Samples 또는 Alter Sample에서 각 표준 바이알의 분자량을 Component Editor에 추가합니다.

2. GPC 데이터를 처음 사용하는 경우 마법사로 새 Processing Method를 생성합니다. LC 데이터로 작업할 때 대부분의 화면은 Processing Method를 개발하는 것과 유사하지만 몇 가지 차이점이 있습니다. Calibration 창에서 검량선에 대한 검량의 종류, 검량 적합 및 X축을 선택해야 합니다. 검량선이 생성된 후 피팅(Fitting)을 수정해야 한다고 판단되면 다음 팁에서 설명드립니다.

3. Column Set 창에는 무효 부피 시간, 또는 배제 한계 및 총 부피 시간, 또는 투과 한계가 필요합니다. 이 값은 사용중인 컬럼 또는 컬럼 뱅크에 따라 다릅니다.

4. 마법사를 마친 후 표준 물질에 대한 적분을 확인하고 필요에 따라 수정하여 단일 분산 표준 물질에 대한 피크만 적분되도록 합니다.

5. 샘플을 선택한 다음 Processing Method Wizard 도구를 클릭하여 광범위한 샘플에 대한 Processing Method를 수정합니다. Wizard가 열리면 Back 버튼을 몇 번 클릭하여 피크 검출 및 적분 매개 변수로 이동한 다음 마법사를 진행합니다.

6. Broad Unknowns and Standards 창에서 광범위한 샘플의 이름을 입력할 수 있습니다.

7. Processing Method에 대한 모든 변경 사항을 저장하고 종료합니다. 광범위한 샘플에 대한 크로마토그램의 적분을 확인하고 필요에 따라 수정합니다.

8. 또는 마법사 없이 Processing Method를 개발할 수 있습니다. 피크 검출 및 적분을 위해 Integration 탭에는 좁은 피크와 넓은 피크 모두에 대한 매개 변수가 있습니다.

9. 또한 Calibration 탭으로 이동하여 V0 및 Vt를 포함한 검량 매개 변수를 설정합니다. 마지막으로 Slicing 탭에서 광범위한 샘플의 이름을 지정할 수 있습니다.

 

아주 간단합니다!

추가 정보