Processing Method - 3D LC 데이터를 PDA 데이터나 3D MS 데이터 중 하나와 작업하거나, PDA 데이터, 3D MS 데이터 둘 모두와 함께 작업하기 - wkb262816

목적 또는 목표

3D LC 데이터를 PDA 데이터나 3D MS 데이터 중 하나와 작업하거나, PDA 데이터, 3D MS 데이터(ACQUITY QDa 또는 SQDII에 서 얻음) 둘 모두와 함께 작업할 때 Processing Method의 어떤 부분이 필요한지 결정합니다.

환경

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• Empower Tip of the Week #329

절차

3D 질량 검출을 위한 이 팁에서 ACQUITY QDa를 예시로 사용했습니다. 이것은 Processing Method 내의 다양한 옵션 중 하나의 예에 불과합니다.
Waters Knowledge Base에서 Processing Method 내의 탭 관련 세부 사항에 대한 많은 팁을 찾을 수 있습니다. 이 팁에서는 개요 및 몇 가지 지침을 제공합니다.

1단계
Integration 탭에서 시작합니다. Apex Track이나 Traditional을 사용하는지에 관계없이 크로마토그램에서 적분할 부분을 결정한 다음 피크 너비(peak width)와 문턱값을 최적화하는 것이 좋습니다. 크로마토그래피에 따라 크로마토그램 일부의 피크 검출 및/또는 적분을 최적화하기 위해 시간별 이벤트를 추가해야 할 수 있습니다(그림 1). 

2단계
Smoothing/Offset 탭은 두 가지 용도로 사용됩니다. 노이즈가 지나치게 많은 바탕선에 평활화 인수를 적용하거나, PDA 및 ACQUITY QDa 모두에서 수집하는 경우 Offset을 사용하여 추출된 크로마토그램을 정렬함으로써 MS 스펙트럼이 적절한 머무름 시간의 UV 피크를 취할 수 있도록 합니다(그림 2).

3단계
MS 3D Channel 탭은 ACQUITY QDa 데이터로 작업할 때 사용되며 피크에서 스펙트럼이 추출되는 위치, MS 피크 추적 및 노이즈가 많은 TIC 플롯 개선을 위한 CODA(Component Detection Algorithm)의 사용이 포함됩니다.(그림 3).

4단계
Purity 탭은 PDA 작업 시 UV 스펙트럼 순도를 결정할 때 사용되며 Spectral Contrast 및 Purity 매개변수를 모두 포함합니다(그림 4).

5단계
PDA Library Search 탭은 UV 스펙트럼 라이브러리를 검색하고 여러 UV 라이브러리에서 검색을 자동화하는 경우 사용됩니다(그림 5).

6단계
MS Library Search 탭은 MS 스펙트럼 라이브러리를 검색하고 여러 MS 라이브러리에서 검색을 자동화할 때 사용됩니다(그림 6).

7단계
MS Expected Mass 탭은 성분 기반 기대 질량 프로세싱 또는 주입 기반 기대 질량 프로세싱에 사용됩니다. 성분 기반 질량 프로세싱의 경우, 성분에 대한 기대 질량을 지정하면 Empower가 이 피크의 기본 질량을 지정된 기대 질량과 비교합니다. 주입 기반 질량 프로세스의 경우, Sample Set Method에서 기대 질량을 지정하면 Empower가 이 피크의 기본 질량을 지정된 기대 질량과 비교합니다(그림 7).

8단계
Components 탭은 이름 및/또는 라벨, 기대 머무름 시간, 머무름 시간 창으로 피크를 식별하는 데 사용됩니다. Calibration 옵션에는 X Value, Y Value, Fit 및 Weighting 필드가 포함됩니다. Internal Standard에 대한 옵션이 있습니다. 이 테이블에는 상대 머무름 시간 피크 및 CCompRef 피크 및 사용자 정의 필드와 함께 사용되는 CConst 값을 포함하여 많은 다른 필드가 있습니다(그림 8 및 9).

9단계
불순물 분석의 경우 Impurity 탭을 사용하여 불순물 반응 및 ICH 임계값을 정의하고, 일반적인 성분 타입의 불순물을 그룹화하고 잠재적 독성 불순물에 대해 별도의 한계를 설정합니다(그림 10).

10단계
Peak Ratios 탭은 한 채널의 피크 반응 대 다른 채널의 피크 반응의 비율을 계산할 수 있는 간단한 방법을 제공합니다. 탭에 MS Ion Ratios라고 표시되어 있어도, 이 기능은 모든 검출기의 2D 데이터에 사용할 수 있습니다(그림 11).

11단계
Default Amounts/Purity 탭에서 순도 계수와 함께 표준 성분의 양을 지정할 수 있습니다. 이는 Run Samples 또는 Alter Sample 대신 Component Editor에서 이 정보를 지정하는 대안입니다(그림 12).

12단계
Empower가 해당 피크의 합계를 계산하도록 피크를 그룹화하는 두 가지 방법이 있습니다. 이는 그룹에 명명된 피크가 추가되는 이름별로 수행하거나, 피크를 함께 그룹화할 시간 범위를 지정하는 시간별로 수행할 수 있습니다(그림 13).

13단계
대부분의 Method는 일부 유형의 System Suitability 측정을 필요로 합니다. Plate Count, Resolution 및 Tailing Factor와 같은 System Suitability 계산은 Suitability 결과를 활성화하고 Void Volume Time을 지정하여 수행됩니다. 다른 옵션에는 다양한 방법으로 계산된 시그널 대 잡음비가 포함됩니다(그림 14).
참고: 여기에는 System Suitability 옵션이 필요하며, 이 옵션을 구매하여 설치해야 합니다.

14단계
Limits 탭은 Suitability 탭과 함께 작동하며 System Suitability 옵션의 일부입니다. System Suitability 필드 및 사용자 정의 필드를 포함하여 피크 필드에 한계를 설정할 수 있습니다. 선택된 필드의 값이 이러한 한계를 벗어날 경우, 피크에는 플래그가 지정되고 결과는 Faulted로 표시됩니다(그림 15).

15단계
Noise and Drift 탭은 Empower가 크로마토그램 내의 지정된 시간 영역에 대해 Detector Noise and Drift를 계산하는 데 사용됩니다(그림 16).

추가 정보

이 작업은 Pro 또는 QuickStart 인터페이스에서 수행할 수 있습니다.