PDA 및 QDa 검출기의 다중 성분 피크 순도 - Tip258

목적 또는 목표

피크가 스펙트럼으로 순수하지 않다고 판단되면 크로마토그래피 피크 아래에 스펙트럼이 다른 구성 요소가 몇 개 있는지 궁금할 수 있습니다. 이때 Multi Component Peak Purity가 도움이 됩니다. 방법은 다음과 같습니다.

환경

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• Empower Tip of the Week #258

절차

1단계
하나의 샘플 중 카페인 피크를 살펴보면, 피크가 스펙트럼적으로 순수하지 않다는 결론을 내릴 수 있습니다. Purity Angle은 Purity Threshold보다 크고 Purity Plot은 Threshold 라인 위의 Purity 라인을 피크의 끝쪽으로 표시합니다. (이 화면은 Review에서 Results 도구를 선택하여 찾을 수 있습니다) (그림 1).

2단계
Purity Angle/Purity Threshold 비율의 최대 값을 가진 피크의 포인트인 'Point of Maximum Impurity'를 표시하는 마커를 추가합니다. 플롯 속성에서 'Annotate Peak Apex/Max Impurity'를 선택합니다(그림 2).

3단계
카페인 피크 아래에 스펙트럼이 다른 구성 요소가 몇 개 있는지 확인하려면 Processing Method 의 Purity 탭으로 이동하여 'Purity Passes'(순도 통로) 기능을 사용합니다. Purity Pass '1'이 기본값입니다(그림 3).

4단계
Purity Passes를 '2'로 설정하면, Empower는 Purity Pass 1에서 얻은 'apex spectrum'과 'maximum impurity spectrum'의 두 가지 분석 스펙트럼을 선택합니다. 그런 다음 Empower는 피크의 나머지 스펙트럼 각각과 비교합니다.
• 각 피크 스펙트럼에 대해 Empower는 두 분석 스펙트럼을 합산하여 모델 스펙트럼을 생성합니다.
• 합계를 생성할 때 Empower는 먼저 각 분석 스펙트럼에 스케일링 인수를 적용합니다. 모델 스펙트럼의 모양과 정규화는 이러한 스케일 인수의 값에 따라 달라집니다.
• 대상 피크 스펙트럼에 가장 적합한 모델 스펙트럼을 찾을 때까지 모델 스펙트럼의 모양과 정규화를 변경하여 두 스케일 인수를 조정합니다.
• Empower는 이 최적으로 일치하는 모델 스펙트럼과 대상 피크 스펙트럼 사이의 스펙트럼 대비 각도를 계산합니다. Empower는 이 각도를 두 번째 Purity
Pass에 대한 Purity Plot에 플롯합니다.
• 각 피크 스펙트럼에 대해 위의 단계를 반복한 후, Empower는 전체 피크에 대한 두 번째 Purity Pass에 대한 Purity Angle을 플롯하고 두 번째 Purity Pass에 대한 Purity Angle을 계산하며 Purity Pass 2에 대한 최대 불순물 스펙트럼을 찾습니다.
• 세 번째 Purity Pass의 경우, Empower는 Apex Spectrum, Purity Pass 1의 최대 불순물 스펙트럼 및 Purity Pass 2의 최대 불순물 스펙트럼을 사용하여 모델 스펙트럼을 생성하고 진행합니다.
• 네 번째 Purity Pass의 경우, 어떤 일이 발생할지 알고 있다고 생각합니다.

만약 표적 스펙트럼과 분석 스펙트럼이 모두 두 화합물의 혼합물일 경우, 모든 표적 스펙트럼이 두 분석 스펙트럼의 각각의 "최적 맞춤" 합계와 일치하기 때문에 수학적 계산은 유효한 것입니다. 표적 스펙트럼과 분석 스펙트럼이 모두 세 가지 화합물의 혼합물일 경우 일부 표적 스펙트럼은 두 분석 스펙트럼의 "최적 맞춤" 합계와 일치하지 않지만 세 분석 스펙트럼의 "최적 맞춤" 합계는 모두 일치합니다.

5단계
두 번의 Purity Pass로 데이터를 다시 프로세스하면 다음과 같은 결과가 나타납니다. 두 번째 Purity Pass의 Purity Angle은 Purity Threshold보다 작으며 두 번째 Purity Pass의 Purity Plot은 피크를 가로 질러 파란색 라인 아래에 녹색 라인을 표시합니다. 플롯에서 'M'이 있는 선은 Purity Pass 1의 최대 불순물 지점이며 '2'가 있는 선은 Purity Pass 2의 최대 불순물 지점입니다(그림 4).

6단계
이 피크에 대한 결론은 피크 아래에 두 개의 스펙트럼이 다른 구성 요소인 카페인과 불순물이 있다는 것입니다. 각 Purity Pass의 결과를 요약한 차트를 참조하십시오(그림 5).

추가 정보

최종 참고 사항: 이 작업은 Pro 또는 QuickStart 인터페이스에서 수행할 수 있습니다.