ACQUITY Premier Glycan BEH C18 AX 컬럼을 사용할 때 RapiFluor-MS blank에서의 간섭 피크를 줄이는 방법 - WKB231393

환경

• 혼합 모드 크로마토그래피
• BEH(Bridged Ethylene Hybrid)
• 음이온 교환(AX)
• GlycoWorks
• RapiFluor-MS
• ACQUITY Premier Glycan BEH C18 AX

답변

참조: MS 강화 유도체화 및 혼합 모드 크로마토그래피를 이용한 고감도 산성 N-glycan 프로파일링

추가 정보

위에 링크된 문서에서 출처됨:

"선택성을 고려할 때, 혼합 모드 크로마토그래피는 HILIC보다 시료전처리로 인한 간섭을 더 받는것으로 나타났습니다. RFMS의 여러 형광 활성 시약 피크 유도체화는 글라이칸 용리 창에서 확인되었습니다. 이러한 피크의 대부분은 글라이칸 유도체화 반응의 부산물과 SPE 세척 단계에서 포함된 일부 불순물로 인해 발생했습니다. 원래 RFMS 시료전처리 프로토콜을 조정하면 이러한 각각의 간섭을 크게 줄일 수 있습니다[18]. SPE 정제 단계를 반복적으로 적용하여 m/z 값이 450.2Da인 RFMS 부산물 피크가 성공적으로 제거되었습니다(보조 그림 S5). 또한 효소적 탈당화에 앞서 샘플를 탈염함으로써 인산 이온에 의해 유도된 또 다른 넓은 간섭 피크가 제거되었습니다(보조 그림 S6). 이러한 간섭은 700 - 2000 m/z 범위의 수집 창에서 글라이칸으로 표시된 RFMS를 선택적으로 검출할 수 있기 때문에 주어진 MS 검출기를 간섭하지 않았습니다. 그리고 추가 SPE 정제 단계로 인한 샘플 손실이 미미했다는 점도 언급할 필요가 있습니다. 본 연구에서 연구된 샘플의 경우, SPE의 1회 통과에 비교하여 2회 통과 시 90% 이상의 회수율로 글라이칸이 얻어진 것으로 확인되었습니다. SPE 절차의 최적화에 대한 자세한 내용은 보충 자료를 참조하십시오."

참고 항목:

RapiFluor-MS Blank를 ACQUITY Premier Glycan BEH C18 AX 컬럼에 주입할 때 일반적으로 어떤 피크가 관찰됩니까?

MaxPeak Premier | 비특이적 흡착 – 인포그래픽

ACQUITY Premier C18 AX 전하 기반 글라이칸 용액 인포그래픽

ACQUITY Premier Glycan BEH C18 AX Columns and IonHance Glycan C18 AX Ammonium Formate Concentrate Care & Use Manual("ACQUITY Premier Glycan BEH C18 AX 컬럼 및 IonHance Glycan C18 AX Ammonium Formate Concentrate 관리 및 사용 설명서")