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Waters Korea

동일한 Isocratic Method를 실행할 때 새 C18 컬럼이 강산(pH 3.7)에 대한 머무름이 동일한 파트 넘버의 기존 컬럼에 비해 길지만 중성 화합물에 대한 머무름 차이는 보이지 않는 이유는 무엇입니까? - WKB94543

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환경

  • 역상 크로마토그래피 머무름
  • C18 컬럼
  • 선택성 변동
  • 머무름 변동

답변

새 C18 컬럼은 기존(사용된) C18 컬럼에 비해 C18 리간드 및 엔드캡 그룹이 더 많으며, 이는 머무름 및 선택성에 영향을 미칠 수 있습니다.

추가 정보

기존 C18 컬럼은 가수분해라는 프로세스를 통해 엔드캡 그룹과 C18 리간드를 모두 잃는 경향이 있습니다.

가수분해가 진행됨에 따라 점점 더 많은 엔드캡 그룹과 C18 리간드가 입자 표면에서 절단됩니다.

엔드캡 그룹 또는 리간드가 입자 표면에서 절단될 때마다 실라놀이 노출됩니다(Si-OH).

pH 3.7에서 강산은 음전하를 띕니다. 또한, 노출된 실라놀은 대부분 음전하를 띕니다.

기존 컬럼에 실라놀 노출이 더 많은 경우, 동일 파트 넘버의 새 컬럼을 사용하여 패킹에 더 많은 음의 표면 전하를 나타낼 수 있습니다.

이렇게 음전하를 띈(비양성자화 된) 실라놀은 노출된 실라놀의 수가 증가할 때 음전하를 띈 산을 더 빨리 밀어냅니다.

동일한 파트 넘버의 새 컬럼에서는 노출된 실라놀이 훨씬 적으므로 결과적으로 음의 표면 전하가 강산을 배척하는 정도가 낮기 때문에 새 컬럼에서 머무름 시간이 더 길어집니다.

이 조건에서, 중성 화합물은 기존 컬럼과 새 컬럼의 머무름에 차이가 없으므로, 두 컬럼의 C18 리간드 양은 여전히 유사합니다.

Isocratic Method 실행 시 새로운 C18 컬럼이 구형의 사용한 컬럼(동일 파트 넘버를 가짐)보다 긴 머무름을 보이는 이유는 무엇입니까?를 참조하십시오.

오래되거나 이미 사용한 컬럼에서 새 LC Method를 개발할 수 있습니까?를 참조하십시오.

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