Isocratic Method 또는 Gradient Method 실행 시 새로운 C18, C8, C4(또는 다른 역상) 컬럼이 동일한 파트 넘버를 가진 구형의 사용된 컬럼보다 긴 머무름을 보이는 이유는 무엇입니까? - WKB57068

환경

• C18 컬럼
• 컬럼 비교

답변

새로운 C18 컬럼은 구형의 C18 컬럼에 비해 C18 리간드 및 엔드캡 작용기가 더 많이 존재하는 경향이 있습니다.

생체 분자는 새 컬럼에서 더 많은 비특이적 흡착을 겪을 수 있으며, 이로 인해 머무름 시간이 약간 길어질 수 있습니다.

추가 정보

새로운 C18 컬럼(동일한 파트 넘버의 구형 C18 컬럼과 비교)이 더 긴 머무름을 나타내는 데에는 많은 이유가 있을 수 있습니다.

그 원인은 일반적으로 구형의 컬럼이 가수 분해로 인한 C18 리간드 손실이 있기 때문입니다.

컬럼이 리간드를 잃는 경우, 표면의 소수성은 점차적으로 줄어듭니다. 동일한 파트 넘버로 된 새로운 C18 컬럼을 설치하면 경우에 따라 (일반적으로 컬럼을 몇 년 동안 사용한 경우) 상당히 긴 시간 보관할 수 있습니다.

또한 구형의 컬럼은 가수 분해로 인해 엔드캡 작용기 손실이 있을 수 있습니다. 컬럼이 엔드캡 작용기를 손실하면 더 많은 실라놀 작용기가 노출됩니다. 따라서 극성 입자 표면이 더 커지고 오래된 입자에서 음이온 표면 전하가 증가합니다. 이는 머무름 성능과 선택성에 극적인 영향을 미칠 수 있습니다.

바이오의약품를 분석하는 경우: 소 혈청 알부민과 같은 바이오 분자를 반복적으로 주입하면 컬럼을 부동태화하고 새 컬럼 에서 분석 물질의 비특이적 흡착을 최소화하는 데 도움이 될 수 있습니다.