역상 LC 컬럼을 실행할 때 피크 테일링이 발생하는 일반적인 원인은 무엇입니까? - WKB237593

환경

• UltraPerformance Liquid Chromatography(UPLC)
• Ultra High Performance Liquid Chromatography(UHPLC)
• 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)
• 피크 테일링
• 문제 해결

답변

모든 피크에서 테일링이 발생하는 경우라면 다음과 같은 잠재적 이유가 있습니다.

1. 모든 분석 물질이 염기성인 경우 모든 피크에서 "염기 테일링"이 발생할 수 있습니다.

• 다음과 같은 경우 염기성 분석 물질은 약한 양이온 교환을 통해 역상 컬럼에서 테일링됩니다.
  1. 이동상 pH로 인해 염기성 분석 물질이 양전하를 띠게 됩니다
  2. 이동상 pH로 인해 입자 표면의 잔류 실라놀기가 음전하를 띠게 됩니다(일반적으로 pH ~2.5 이상).
  3. 위의 기준이 충족되고 이온 짝짓기제가 사용되지 않은 경우

2. 주입기와 검출기 사이의 흐름 경로 중 어딘가가 부적절하게 연결된 경우입니다. 예를 들면:

• 손가락으로 조이는 PEEK 피팅(Fitting) 사용시 튜브가 미끄러짐
• 스테인리스 피팅(Fitting) 또는 기타 피팅(Fitting)의 페룰(Ferrule) 깊이가 부적절함
• 연결부 내부의 작은 틈새

3. 강한 샘플 용매 효과입니다(일반적으로 피크 모양 비대칭 또는 분할로 표시되지만 때때로 모든 피크에 영향을 미치고 가끔 테일링이 나타날 수 있음). 예를 들면:

• 샘플 희석액이 시작 이동상에 비해 비극성 용매(역상)의 비율이 더 높은 경우
• 샘플 희석액이 시작 이동상에 비해 극성 용매(순상; HILIC)의 비율이 더 높은 경우

4. 질량분석기를 실행하는 경우 방출기가 오염되어 피크 모양에 문제가 발생할 수 있습니다.프로브에 무효 부피(dead volume)가 있을 수도 있습니다(Tool-free 버전 아님).

 

만약 일부 피크만 다른 여러 피크의 혼합물 내에서 테일링되는 경우라면 다음과 같은 잠재적 이유가 있습니다.

1. "염기 테일링"은 특정 분석 물질이 염기성이고 다른 분석 물질은 그렇지 않은 경우 일부 피크에서만 발생할 수 있습니다.

• 다음과 같은 경우 염기성 분석 물질은 약한 양이온 교환을 통해 역상 컬럼에서 테일링됩니다.
  1. 이동상 pH로 인해 염기성 분석 물질이 양전하를 띠게 됩니다
  2. 이동상 pH로 인해 입자 표면의 잔류 실라놀기가 음전하를 띠게 됩니다(일반적으로 pH ~2.5 이상).
  3. 위의 기준이 충족되고 이온 짝짓기제가 사용되지 않은 경우

2. 강력한 샘플 용매 효과입니다(때로는 초기 용리 피크에만 영향을 미칠 수 있으며, 일반적으로 피크 모양 대칭 또는 분할로 보여지지만, 테일링을 나타낼 수 있음). 예를 들면:

• 샘플 희석액이 시작 이동상에 비해 비극성 용매(역상)의 비율이 더 높은 경우
• 샘플 희석액이 시작 이동상에 비해 극성 용매(순상; HILIC)의 비율이 더 높은 경우

 

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