SEC Method를 수행할 때 버퍼의 몰 농도를 높이면 응집체 백분율이 증가하는 이유는 무엇입니까? - WKB229751

환경

• 크기 배제 크로마토그래피(SEC)
• 고분자량 종(HMWS)
• 응집체
• 이합체
• 삼량체

답변

염의 몰 농도가 증가함에 따라 소수성 상호 작용이 증가하여 단백질이 더 빠른 속도로 응집됩니다.

추가 정보

Alliance 시스템 또는 이 기능을 가진 다른 Waters LC 시스템에서 Autoblend 기능을 사용하여 pH 및 몰 농도 연구를 수행하여 변화가 단백질 행위에 미치는 영향을 확인합니다.

pH 6.0에서 상수 20mM 인산 버퍼 사용
pH 6.0에서:
100mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
150mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
200mM 염화나트륨의 이동상 실행 - 결과 모니터링
250mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링

pH 6.5에서 일정한 20mM 인산 버퍼 사용
pH 6.5에서:
100mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
150mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
200mM 염화나트륨의 이동상 실행 - 결과 모니터링
250mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링

pH 7.0에서 20mM 인산 버퍼(phosphate buffer)를 사용합니다.
pH 7.0에서:
100mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
150mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
200mM 염화나트륨의 이동상 실행 - 결과 모니터링
250mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링

pH 7.5에서 20mM 인산 버퍼(phosphate buffer)를 사용합니다.
pH 7.5에서:
100mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
150mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링
200mM 염화나트륨의 이동상 실행 - 결과 모니터링
250mM 염화나트륨 이동상 실행 - 결과 모니터링

이는 어떤 pH 및 NaCl 몰 농도가 최상의 결과를 제공할 것인지를 실제로 결정할 수 있는 좋은 방법입니다.