ACQUITY UPLC Protein BEH SEC 125Å, 1.7µm, 4.6mm x 150mm 컬럼(186006505)에서 BEH125 SEC Protein Standard Mix(186006519)를 사용하여 검량선을 생성할 수 있습니까? - WKB228431

환경

• UltraPerformance Liquid Chromatography(UPLC)
• BEH(Bridged Ethylene Hybrid)
• 크기 배제 크로마토그래피(SEC)
• 단백질 분리
• BEH125 Protein Standard
• ACQUITY UPLC Protein BEH SEC

답변

아니요

추가 정보

검량선에 유형에 따라 미지의 단백질의 분자량을 결정할 수 없습니다.
그 이유는 두 단백질이 같은 분자량을 가질 수 있지만 용액에서 다른 크기(유체역학적 반경)를 가질 수 있기 때문입니다.
결과적으로 폴리머처럼 바이오의약품에 대해서는 검량선을 사용할 수 없습니다.

Waters가 발행한 SEC 컬럼에 대한 검량선은 GPC 컬럼에 대한 검량선과 다릅니다.
발행된 SEC 검량선은 단순히 공극 크기에 따른 해당 컬럼의 상한 및 하한을 보여주기 위해 작성되었습니다.
이는 분자량을 기준으로 하는 것이 아니라 단백질의 유체역학적 반경을 기준으로 합니다. 테스트한 단백질의 분자량을 알기 때문에 분자량 범위를 명시할 수 있습니다.

ACQUITY UPLC BEH SEC Columns and Standards Care & Use Manual("ACQUITY UPLC BEH SEC 컬럼 및 표준물질 관리 및 사용 설명서")

Guide to Size-Exclusion Chromatography (SEC) of mAb Aggregates, Monomers, and Fragments("mAb 응집체, 단량체 및 조각의 크기 배제 크로마토그래피(SEC) 안내서")