Waters Styragel 컬럼을 THF에서 DMF로 전환하기 위해 용매 전환 절차를 수행하는 방법 - WKB197282

목적 또는 목표

Styragel 컬럼의 패킹재를 테트라히드로퓨란(THF)에서 디메틸포름아미드(DMF)로 전환합니다.

환경

• 겔 투과 크로마토그래피(GPC)
• Styragel컬럼
• 용매 전환

절차

1. 컬럼 오븐을 50°C로 설정합니다. DMF 용매를 주입하기 전에 컬럼을 느린 유속으로 THF의 온도에 도달하도록 합니다. (2시간 후 컬럼 오븐을 55°C로 올립니다.) 그리고 DMF로의 용매 전환을 시작합니다. 2시간 후 컬럼 오븐 온도를 60°C로 올립니다.(100% DMF에서 그 다음의 조작법은 4단계 참조).
2. 7.8 x 300mm 컬럼의 경우 전반 과정에서 펌프 유속을 0.1mL/분으로 설정합니다. 6.0 x 150mm 컬럼의 경우, 전반 과정에서 0.06mL/분의 유속을 사용합니다. 4.6 x 300mm 컬럼의 경우 절반 과정에서 0.03mL/분의 유속을 사용합니다.
3. 그래디언트를 실행하고 있다면 4시간 동안 95:5 THF/DMF에서 100% DMF까지 프로그래밍합니다.
   • Isocratic 모드에서 실행 중인 경우, 95:5 THF:DMF에서 100% DMF로 5% 단계로 분리되는 THF:DMF 용액을 만들고 4시간 동안 DMF 강도를 높입니다.
4. 컬럼당 6시간 동안 100% DMF로 플러시합니다.
   • 컬럼 뱅크에 두 개의 컬럼이 있는 경우 총 12시간 동안 플러시합니다.
   • 이는 컬럼 당 10개의 컬럼 부피에 해당합니다.
5. 이 용매 전환은 컬럼 전체 수명 동안 한 번만 수행해야 합니다.

추가 정보

기존 GPC 컬럼의 경우, 만약 컬럼이 구식이거나 오래동안 사용되거나 및/또는 컬럼이 여러 용매에 노출되면 컬럼 손상 위험이 증가합니다.

GPC 컬럼 - 용매 전환을 수행하지 않을 경우의 일반적인 작동 절차:

• 예를 들어 7.8 x 300mm 컬럼의 경우에는 항상 0.1mL/분에서 5분에 걸쳐 약 1mL/분으로 증가시킵니다.
• 유속 램핑 다운도 마찬가지로 수행합니다.
• Styragel 컬럼에서 GPC 분리를 수행할 때의 일반적인 작동 유속:
  • 7.8 x 300mm 컬럼 - 1.0mL/분
  • 6.0 x 150mm 컬럼 - 0.6mL/분
  • 4.6 x 300mm 컬럼 - 0.3mL/분
• 컬럼을 사용하지 않지만 시스템에 보관할 경우 항상 최소 유속을 0.1mL/분으로 유지하십시오. 펌프의 전원을 끄지 마십시오.