LC 시스템의 분리 성능을 극대화하기 위한 최상의 컬럼 ID를 결정하는 방법은 무엇입니까? - WKB121874
환경
- LC 시스템
- 컬럼 성능
- 대역 확산(Bandspread)
- 분산
- 분리능
- 피크 너비
답변
측정된 시스템 분산 부피를 기준으로 컬럼 ID를 같게 합니다.
추가 정보
모든 LC 시스템에 내재된 대역 확산(분산)은 주입기와 검출기 사이 시스템 흐름 경로의 부피(설치된 컬럼 없음)와 직접적인 관련이 있으며, 이로 인해 효율성 또는 크로마토그래피 성능/분리능이 저하됩니다.
최대 효율성을 얻으려면 기기의 특정 대역 확산 값(시스템 분산)을 기준으로 컬럼 ID를 선택해야 합니다. 부피가 큰 컬럼(더 큰 컬럼 ID)은 시스템 부피의 부정적인 영향(분산)에 덜 민감하기 때문입니다.
다음은 시스템 대역 확산(분산) 측정 값에 따라 가장 적합한 컬럼 ID를 결정하는 방법에 대한 몇 가지 일반적인 지침입니다.
- 시스템 대역 확산(분산) 값이 120µL보다 큰 경우:
- 4.6mm ID 컬럼을 성공적으로 실행하려면 0.010" 또는 0.009"와 같은 ID가 작은 튜빙을 사용하여 시스템 대역 확산(분산)을 줄여야 할 수 있습니다.
- 관심 유기용매의 머무름 시간(RT)을 늘릴 수도 있습니다.
- 더 오래 머무는 피크는 더 많은 부피로 용리되며, 시스템 대역 확산(분산) 효과에 덜 민감합니다.
- 2.0 이상의 용량 계수가 선호됩니다.
- 시스템 대역 확산 값이 80µL-120µL인 경우 시스템 대역 확산(분산) 효과에 대한 걱정 없이 4.6mm ID 컬럼을 실행할 수 있어야 합니다.
- 관심 유기용매의 머무름 시간(RT)을 늘릴 수도 있습니다.
- 2.0 이상의 용량 계수가 선호됩니다.
- 더 오래 머무는 피크는 더 많은 부피로 용리되며, 시스템 대역 확산(분산) 효과에 덜 민감합니다.
- 크로마토그래피에서 피크의 용량 인자를 결정하는 역할과 중요성은 무엇입니까?를 참조하십시오.
- 관심 유기용매의 머무름 시간(RT)을 늘릴 수도 있습니다.
- 시스템 대역 확산 값이 26µL-80µL인 경우 시스템 부피로 인한 피크 넓어짐 현상에 대한 걱정 없이 3.0mm ID(또는 4.6mm ID) 컬럼을 실행할 수 있어야 합니다.
- 더 작은 3.0mm ID는 용매를 절약하는 데 도움이 됩니다.
- 4.6mm ID 컬럼도 여전히 좋은 선택 사항입니다. ID가 넓을수록 시스템 대역 확산(분산) 효과에 덜 영향을 받기 때문입니다.
- 시스템 대역 확산 값이 25µL 혹은 그 이하인 경우, 시스템의 대역 확산(분산) 부피로 인한 피크 넓어짐 현상에 대한 걱정 없이 2.1mm ID(3.0mm ID 또는 4.6mm ID) 컬럼을 실행할 수 있어야 합니다.
- 0.005"의 튜빙 ID는 일반적으로 <25µL 시스템 대역 확산(분산) 부피를 얻기 위해 사용됩니다.
- 2.1mm ID 컬럼은 MS Method에 사용되는 유속이 질량 분석기보다 낮기 때문에 더 선호됩니다.
- 25μL는 2.1mm ID 컬럼을 사용하여 피크 너비에 부정적인 영향을 미치는 가장 높은 대역 확산 부피입니다.
- 관심 유기용매의 머무름 시간(RT)을 늘릴 수도 있습니다.
- 2.0 이상의 용량 계수가 선호됩니다.
- 머무름 시간이 긴 피크일수록 용리 부피가 더 크며 시스템 대역 확산(분산) 효과에 덜 민감합니다.
- 광학검출기를 사용하는 경우 2.0μm 미만의 입자 크기로 채워진 3.0mm ID 컬럼을 사용하는 것이 좋습니다.
- 컬럼 ID가 클수록 시스템 대역 확산 효과에 영향을 적게 받습니다.
Bandspread (System Dispersion) Test Instructions.pdf를 참조하십시오.
Bandspread Test Result - Calculated Manually - 68 uL - HPLC.pdf를 참조하십시오.
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