새로운 Glycan BEH Amide 컬럼의 컨디셔닝 방법 - WKB111759

목적 또는 목표

새로운 Glycan BEH Amide 컬럼을 컨디셔닝합니다.

 

환경

• UPLC
• HPLC
• HILIC
• 글라이칸 분석

절차

사용하지 않은 새로운 Glycan BEH Amide 컬럼을 최대한 활용하려면 실제 테스트 샘플 분석 전에 컬럼을 컨디셔닝하고 성능을 시연하는 것이 가장 좋습니다. 안정적인 크로마토그래피 프로파일이 생성될 때까지 대표 샘플을 순차적으로 주입하여 컨디셔닝합니다.

Glycan BEH Amide 컬럼을 ammonium formate 이동상과 함께 사용하더라도 0.1%TFA 함유 이동상 Gradient로 컬럼을 먼저 컨디셔닝하는 것이 유리할 수 있습니다. TFA는 이온성 형태로 HILIC 고정상에 강하게 흡착하여 컬럼 성능이 저하될 수 있는 중화 및 이온 쌍 오염의 컬럼이 정지상을 세척하는 데 효과적입니다.

추가 정보

시알릴화 글라이칸에 문제가 있는 경우, 아래의 프로토콜을 사용해보십시오.

1. 10mg/mL fetuin 용액 준비:

- 1.5mL 튜브에서 10mg의 fetuin(Sigma F3004 또는 동등 제품)을 측정합니다.

- 모든 고체 화학물질을 1mL의 18.2MOhm 물에 용해시킵니다. 볼텍싱을 통해 잘 혼합합니다.

- Fetuin 용액을 LC 바이알로 옮깁니다.

2. 컨디셔닝 프로토콜:

- LC gradient에 사용되는 컬럼 온도에서 초기 이동상을 포함한 컬럼을 평형화합니다. 시스템 압력 변화가 1분 이내에 10psi 이하인지 확인하십시오.

- 원하는 LC gradient를 사용하여 Glycan 컬럼에 대해 1회의 blank injection(물)을 수행합니다.

- 원하는 LC gradient를 사용하여 Glycan 컬럼에서 10mg/mL fetuin 용액을 3회 이상 주입합니다.

- 주입량: 1μL

- 이제 컬럼이 컨디셔닝되어 사용할 준비가 되었습니다.