Waters Styragel 컬럼을 DMF에서 NMP로 변환하기 위해 용매 전환 절차를 수행하는 방법 - WKB110513

목적 또는 목표

Styragel 컬럼의 충진제를 dimethylformamide (DMF)에서 N-methyl-2-pyrrolidone (NMP)로 전환합니다.

환경

• 겔 투과 크로마토그래피(GPC)
• Styragel
• 용매 교체
• DMF
• NMP

절차

1. 컬럼 오븐을 50–65°C로 설정합니다.
2. 7.8 x 300mm 컬럼의 경우 이 절차 내내 펌프 유속을 0.1mL/분으로 설정합니다.
   • 6.0 x 150mm 컬럼의 경우 이 절차 내내 펌프 유속을 0.06mL/분으로 설정합니다.
   • 4.6 x 300mm 컬럼의 경우 이 절차 내내 펌프 유속을 0.03mL/분으로 설정합니다.
3. 그래디언트를 실행하고 있다면 4시간 동안 95:5 DMF/NMP에서 100% NMP 그래디언트까지 프로그래밍합니다.
   • Isocratic 모드에서 실행 중인 경우, 95:5 DMF/NMP에서 100% NMP로 5% 단계로 분리되는 DMF:NMP 용액을 만들고 4시간 동안 NMP 강도를 높입니다.
4. 컬럼당 100% NMP로 6시간 플러시합니다. 컬럼 뱅크에 두 개의 컬럼이 있는 경우 12시간 동안 플러시합니다. 이는 컬럼당 10 컬럼 부피에 해당합니다.

5. 이 용매 전환은 컬럼 사용기간 동안 한 번만 수행해야 합니다.

추가 정보

GPC 컬럼 - 작동 절차:

• 예를 들어 7.8 x 300mm 컬럼의 경우에는 항상 0.1mL/분에서 5분에 걸쳐 약 1mL/분으로 증가시킵니다.
• 유속 램핑 다운도 마찬가지로 수행합니다.
• Styragel 컬럼에서 GPC 분리를 수행할 때의 일반적인 작동 유속:
  • 7.8 x 300mm 컬럼 - 1.0mL/분
  • 6.0 x 150mm 컬럼 - 0.6mL/분
  • 4.6 x 300mm 컬럼 - 0.3mL/분
• 컬럼을 사용하지 않지만 시스템에 보관할 경우 항상 최소 유속을 0.1mL/분으로 유지하십시오. 펌프의 전원을 끄지 마십시오.