Waters 표준물질 186008927, 186009125 및 186009126의 아미노산 시퀀스는 무엇입니까? - WKB96794

환경

• 다음 세 가지 Waters 표준물질은 동일한 mAb 단백질에서 생성됩니다. NIST mAb(인간화 IgG1 _k) 모노클론 항체는 쥐 현탁 배양액에서 발현되는 재조합 항체입니다.

  • Humanized mAb Mass Check Standard[186009125]

    • 샘플은 16개의 이황화 결합으로 연결된 두 개의 경쇄(LC)와 두 개의 중쇄(HC)로 구성된 온전한 mAb로 구성됩니다. 변형이 없는 평균 몰 질량은 145179.8052g/mol이어야 합니다.

  • mAb Subunit Standard[186008927]

    • 샘플은 Humanized mAb Mass Check Standard[186009125]로 구성되며, Ides로 환원되고 분해됩니다. Ides 효소는 글리신-글리신 아미노산 잔기 사이의 중쇄를 절단합니다. 이 샘플은 세 가지 시퀀스(Fc/2, Fd’ 및 LC)로 구성됩니다.

  • mAb Tryptic Digest Standard[186009126]

    • 이 샘플은 Humanized mAb Mass Check Standard[186009125]로 구성되며, 환원 및 알킬화되어 이황화 결합을 절단합니다. 그 후 트립신(trypsin)으로 소화됩니다. 이 샘플은 HC 및 LC 두 개의 시퀀스로 구성됩니다.

답변

mAb Subunit Fc/2 시퀀스(평균 몰 질량: 23790.6425)

GPSVFLFPPK  PKDTLMISRT  PEVTCVVVDV  SHEDPEVKFN  WYVDGVEVHN  AKTKPREEQY  NSTYRVVSVL  TVLHQDWLNG
KEYKCKVSNK  ALPAPIEKTI  SKAKGQPREP  QVYTLPPSRE  EMTKNQVSLT  CLVKGFYPSD  IAVEWESNGQ  PENNYKTTPP
VLDSDGSFFL  YSKLTVDKSR  WQQGNVFSCS  VMHEALHNHY  TQKSLSLSPGK

mAb Subunit Fd '시퀀스(평균 몰 질량: 25705.8931)

QVTLRESGPA  LVKPTQTLTL  TCTFSGFSLS  TAGMSVGWIR  QPPGKALEWL  ADIWWDDKKH  YNPSLKDRLT  ISKDTSKNQV  VLKVTNMDPA
DTATYYCARD  MIFNFYFDVW  GQGTTVTVSS  ASTKGPSVFP  LAPSSKSTSG  GTAALGCLVK  DYFPEPVTVS  WNSGALTSGV  HTFPAVLQSS
GLYSLSSVVT  VPSSSLGTQT  YICNVNHKPS  NTKVDKRVEP  KSCDKTHTCP  PCPAPELLG

mAb LC(평균 몰 질량: 23127.5093)

DIQMTQSPST  LSASVGDRVT  ITCSASSRVG  YMHWYQQKPG  KAPKLLIYDT  SKLASGVPSR  FSGSGSGTEF  TLTISSLQPD  DFATYYCFQG
SGYPFTFGGG  TKVEIKRTVA  APSVFIFPPS  DEQLKSGTAS  VVCLLNNFYP  REAKVQWKVD  NALQSGNSQE  SVTEQDSKDS  TYSLSSTLTL
SKADYEKHKV  YACEVTHQGL  SSPVTKSFNR  GEC

mAb HC(평균 몰 질량: 49478.5203)

QVTLRESGPA  LVKPTQTLTL  TCTFSGFSLS  TAGMSVGWIR  QPPGKALEWL  ADIWWDDKKH  YNPSLKDRLT  ISKDTSKNQV  VLKVTNMDPA
DTATYYCARD  MIFNFYFDVW  GQGTTVTVSS  ASTKGPSVFP  LAPSSKSTSG  GTAALGCLVK  DYFPEPVTVS  WNSGALTSGV  HTFPAVLQSS
GLYSLSSVVT  VPSSSLGTQT  YICNVNHKPS  NTKVDKRVEP  KSCDKTHTCP  PCPAPELLGG  PSVFLFPPKP  KDTLMISRTP  EVTCVVVDVS
HEDPEVKFNW  YVDGVEVHNA  KTKPREEQYN  STYRVVSVLT  VLHQDWLNGK  EYKCKVSNKA  LPAPIEKTIS  KAKGQPREPQ  VYTLPPSREE
MTKNQVSLTC  LVKGFYPSDI  AVEWESNGQP  ENNYKTTPPV  LDSDGSFFLY  SKLTVDKSRW  QQGNVFSCSV  MHEALHNHYT  QKSLSLSPGK

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