ProteinWorks Auto-eXpress Low 3 Digest Kit (176004077)의 3단계 프로토콜을 사용하여 단백질의 시스테인 함유 잔류물에서 디설파이드 결합을 식별하고 정량화할 수 있습니까?

환경

• ProteinWorks Auto-eXpress Low 3 Digest Kit
• Xevo TQ-S

답변

3단계 프로토콜은 시스테인 함유 잔류물에서 이황화 결합에 영향을 미치지 않습니다. 이황화 결합은 질량 분석기를 사용하여 정량화할 수 있습니다.

추가 정보

질량 분석기 없이는 샘플의 이황화 결합을 정량화하는 것은 매우 어렵습니다. UV만 사용하는 경우 머무름 시간에 차이가 있을 것입니다. 또한, 이는 주로 질량 분석 응용 분야이므로 UV 분석에서 정량을 위해 분해 버퍼, 트립신 용액, 소화 비활성화 시약 및 기타 제제의 양을 크게 늘려야 할 수 있습니다. Waters는 일부 펩타이드의 이황화 결합이 UV 범위에서 우수한 감도를 제공할 것이라는 데이터를 가지고 있지 않습니다. ProteinWorks Auto-eXpress Low 3 Digest Kit (176004077)는 각 시약/표준물질의 양이 최적화 된 자동화 키트입니다. 질량 분석기 없이 수행할 경우, 시약 부피, 배양 시간 및 배양 온도를 최적화해야 합니다.