RapiGest를 사용할 때 분해 시간, 농도 및 온도에 대한 최적값은 무엇입니까? - WKB64974

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환경

분해 시간은 약 1시간입니다. 이는 소수성이 강한 단백질의 경우 더 오래 걸릴 수 있습니다.

최적의 RapiGest 농도는 0.25% ~ 0.1%입니다.

배양 온도는 37°C이어야 하며 약 10분 동안 유지됩니다. 그런 다음 얼음 위에서 약 45분 동안 유지시킨 뒤 분해가 완료되었습니다.

관리 및 사용 설명서의 자세한 단계:

50mM NH4HCO3에 0.1% RapiGest SF 용액 20μL를 넣고 37°C에서 10분 동안 배양합니다.

넘치는 용액을 제거하고 Speed Vac로 겔 조각을 완전히 건조시킵니다.

Trypsin(50mM NH4HCO3에서 12.5ng/μL)을 겔 조각이 다시 부풀 때까지 점차적으로(한 번에 한 방울) 첨가합니다. 얼음 위에서 45분 동안 계속 배양합니다.

넘치는 용액을 제거하고, 50mM NH4HCO3 20μL를 첨가하여 37°C에서 밤새 배양합니다.

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